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通心粉产品中的固醇
谷物
- 荧光法
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A 仪器
A.a Soxhlet提取器
中等大小，具有250ml瓶子和33×94mm套管。
A.b 荧光分光光度计
具有高强度的Xe光源，以及光栅和棱镜激发和发射单色器，每种的分辩率不超过5mm。仪器应可检测不超过1ng硫酸奎宁/ml 0.1N H2SO4。激发波长546nm；发射波长577nm。必须仔细使比色皿四壁干净。用乙醇冲洗比色皿外部并在放入仪器前用不起毛的吸水纸擦干。
B 试剂
B.a 胆固醇标准溶液
在装有约120ml剧烈沸腾的CHCl3和沸石的Soxhlet中对5g研磨通过40号或更细筛的面条提取4h。用CHCl3将提取物洗入100ml容量瓶，冷却，稀释到刻度，混匀。$$移取双份2ml一份放入25ml锥形瓶，并在蒸气浴上于空气缓流下蒸干。向每个瓶中移入10ml CHCl3-Ac2O，振荡混合，放置15min，然后准确加入0.4ml H2SO4塞好，混匀，放置40min〔溶液应保持没有由于H2O而产生的混浊〕，在荧光发生阶段结束1h内读数。$$用胆固醇标准溶液调节荧光计到大约60%T。将大约4ml样品溶液转入清洁的10×10mm比色皿并读数。用5ml CHCl3-Ac2O和0.2ml H2SO4作为空白。
B.b 三氯甲烷-乙酸酐溶液
(5+1)。对每系列测定要新配溶液。用新的或最近干瓶的Ac2O。
C 测定
在装有约120ml剧烈沸腾的CHCl3和沸石的Soxhlet中对5g研磨通过40号或更细筛的面条提取4h。用CHCl3将提取物洗入100ml容量瓶，冷却，稀释到刻度，混匀。$$移取双份2ml一份放入25ml锥形瓶，并在蒸气浴上于空气缓流下蒸干。向每个瓶中移入10ml CHCl3-Ac2O，振荡混合，放置15min，然后准确加入0.4ml H2SO4塞好，混匀，放置40min〔溶液应保持没有由于H2O而产生的混浊〕，在荧光发生阶段结束1h内读数。$$用胆固醇标准溶液调节荧光计到大约60%T。将大约4ml样品溶液转入清洁的10×10mm比色皿并读数。用5ml CHCl3-Ac2O和0.2ml H2SO4作为空白。
D 计算
样品中%胆固醇＝100(ml)×C×(F/F')×100/W式中C是以mg/ml表示的参比标样浓度(0.060)；F和F'分别是2份样品和2份标样在577nm荧光度平均值，每次都进行空白校正；W是样品的mg。
