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面包中的硫胺素〔维生素B1〕
维生素和其它营养物
- 荧光测定法
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A 试剂和装置
需用的试剂和仪器如24-4A中所述。
A.a 盐酸硫胺素工作液
1μg/ml。吸取20ml盐酸硫胺素中间溶液至200ml容量瓶中,用约0.1N HCl稀释至刻度。使用当天配制。
A.b 操作标准溶液
吸取40ml工作液(a)于酸消化容器内,用约0.1N HCl稀释至约150ml,象处理样品一样处理〔最终溶液中盐酸硫胺素含量为0.2μg/ml)。〔用于回收试验,以检查方法的有效性。〕
A.c 直接标准液
0.2μg/ml。吸取40ml工作液(a)于200ml容量瓶内,加约16ml水,以酸性氯化钾洗脱液稀释至刻度。
B 酸消化和酶消化
C 硫胺素氧化为硫色素
D 硫色素荧光的测定
将氧化分析样液提取液的荧光强度与氧化直接标准液的荧光强度进行比较,则可确定氧化分析样液中的硫胺素含量。这些溶液的荧光应分别进行空白校正。硫胺素含量在0-2μg内,其含量与荧光强度呈线性。对于15%NaOH处理后具有高空白荧光读数的分析样液,可用D作空白校正。$$如按规定用份量分析,则$$盐酸硫胺素mg/lb〔以鲜样计〕=(I/B)×(40×454×F/W×1000)$$式中I为分析样液的校正读数;B为标准液的校正读数;W为空气干燥面包样克数;F为空气干燥样与鲜样之重量比。