中国化工网首页 >> 化工助手 >> 化学物质分析方法数据库
维生素制品和果汁中的维生素C〔抗坏血酸〕
维生素和其它营养物
- 2，6-二氯靛酚滴定法
- 〔适用于测定抗坏血酸，不适用于亚铁、亚锡、亚铜、二氧化硫、亚硫酸盐或硫代硫酸盐共存的样品。〕
A 原理
抗坏血酸能将氧化-还原指示剂染料2，6-二氯靛酚还原成无色溶液，终点时，过剩的未还原染料在酸性溶液中呈粉红色。为维持适于反应的酸度并防止抗坏血酸在高pH下自氧化，宜在HPO3-HOAc-H2SO4介质中提取和滴定。
B 试剂
B.a 提取液
B.a.1 偏磷酸-醋酸溶液
于振摇下溶解15g HPO3颗粒或刚捣碎的HPO3于40ml HOAc和200ml水中，稀释至约500ml，经槽纹滤纸迅速过滤于玻塞瓶内。〔HPO3会缓慢地变为H3PO4，但如中冰箱内保存，可稳定7－10天。〕
B.a.2 偏磷酸-醋酸-硫酸溶液
于振摇下溶解15g HPO3颗粒或刚捣碎的HPO3于40ml HOAc和200ml水中，稀释至约500ml，经槽纹滤纸迅速过滤于玻塞瓶内。〔HPO3会缓慢地变为H3PO4，但如中冰箱内保存，可稳定7－10天。〕
B.b 抗坏血酸标准液
1mg/ml。准确称取50mg抗坏血酸参比标准〔贮于远离阳光直射的干燥器中〕于50ml容量瓶中，用前立即以HPO3-HOAc溶液[(a)(1)]稀释至刻度。
B.c 靛酚标准溶液
将保存于碱石灰干燥器中的2，6-二氯靛酚钠盐50mg溶解于加有42mg NaHCO3的50ml水中，猛烈振摇，染料溶解后，用水稀释至200ml。用槽纹滤纸过滤于琥珀色玻塞瓶中，塞紧瓶塞，避免阳光直射，冰箱内保存。〔若某几批靛酚染料和其贮备液会随时间长而产生使终点不明显的分解产物，则可加5.0ml含过量抗坏血酸的提取液到15ml染料试剂中。若还原液实际上不是无色的，则应弃去，重新制备贮备液。如干染料失效，则应重新购买。〕$$在3个盛有5.0ml HPO3-HOAc溶液[(a)(1)]的50ml锥形烧瓶中各加入2.0ml抗坏血酸标准溶液，立即从50ml滴定管用靛酚溶液滴定至明显的淡粉红色持续大于等于5s。〔每次滴定约需15ml靛酚溶液，核对各次滴定数应在0.1ml之内。〕同样滴定3份由7.0ml HPO3-HOAc溶液[(a)(1)]和约等于直接用于滴定的靛酚溶液体积的水构成的空白。从标准滴定结果中减去平均空白值〔通常约为0.1ml〕，求得以抗坏血酸mg/ml靛酚溶液表示的靛酚溶液浓度。每天须用新配制的抗坏血酸标准液标定靛酚溶液。
B.d 百里酚蓝pH指示剂
0.04%。用玛瑙研缸研磨的0.1g指示剂溶于10.75ml 0.02N NaOH溶液中，用水稀释至250ml。变色范围：1.2〔红〕－2.8〔黄〕。
C 大量碱性物质的预试验
将代表性样品磨细或从胶囊内挤出内容物，加约25ml HPO3-HOAc溶液[(a)(1)]，于研杵或滴试板上滴加百里酚蓝指示剂检查pH值〔pH大于1.2表明样品含大量碱性物质〕。对液体制剂，在用指示剂检验前，以HPO3-HOAc溶液[(a)(1)]将代表性样品稀释约2倍。
D 样品测定液的制备
D.a 不含大量碱性物质的干试样
轻轻地磨碎样品，加入HPO3-HOAc溶液[(a)(2)]并研磨至试样呈悬浮状态，用HPO3-HOAc溶液[(a)(1)]稀释至测定体积。指定该体积为Vml。$$〔每克干样品约用10ml提取液，则最终溶液应含抗坏血酸10－100mg/100ml。〕
D.b 含大量碱性物质的干试样
轻轻地磨碎样品，加入HPO3-HOAc-H2SO4溶液[(a)(2)]调节pH至约1.2，并研磨至样品呈悬浮状态，用HPO3-HOAc溶液[(a)(1)]稀释至测定体积，指定该体积为Vml。$$〔每克干样品约用10ml提取液，则最终溶液应含抗坏血酸10－100mg/100ml。〕
D.c 液体试样
取含约100mg抗坏血酸的适量样品，如有大量碱性物质存在，则以HPO3-HOAc-H2SO4溶液[(a)(2)]调节pH至约1.2，用HPO3-HOAc溶液[(a)(1)]稀释至测定体积〔即含抗坏血酸10－100mg/100ml〕，指定该体积为Vml。
D.d 水果和蔬菜汁
充分振摇确保样品混匀，经脱脂棉或快速滤纸过滤，通过压榨使水果完全浆化并过滤制备新鲜果汁，利用市售桔汁压榨装置和滤器压出桔类果汁。取适当量的〔大于等于100ml〕制备好的果汁分别加到等体积的HPO3-HOAc溶液[(a)(1)]中，指定总体积为Vml，混匀，通过快速折叠滤纸过滤。
E 测定
将保存于碱石灰干燥器中的2，6-二氯靛酚钠盐50mg溶解于加有42mg NaHCO3的50ml水中，猛烈振摇，染料溶解后，用水稀释至200ml。用槽纹滤纸过滤于琥珀色玻塞瓶中，塞紧瓶塞，避免阳光直射，冰箱内保存。〔若某几批靛酚染料和其贮备液会随时间长而产生使终点不明显的分解产物，则可加5.0ml含过量抗坏血酸的提取液到15ml染料试剂中。若还原液实际上不是无色的，则应弃去，重新制备贮备液。如干染料失效，则应重新购买。〕$$在3个盛有5.0ml HPO3-HOAc溶液[(a)(1)]的50ml锥形烧瓶中各加入2.0ml抗坏血酸标准溶液，立即从50ml滴定管用靛酚溶液滴定至明显的淡粉红色持续大于等于5s。〔每次滴定约需15ml靛酚溶液，核对各次滴定数应在0.1ml之内。〕同样滴定3份由7.0ml HPO3-HOAc溶液[(a)(1)]和约等于直接用于滴定的靛酚溶液体积的水构成的空白。从标准滴定结果中减去平均空白值〔通常约为0.1ml〕，求得以抗坏血酸mg/ml靛酚溶液表示的靛酚溶液浓度。每天须用新配制的抗坏血酸标准液标定靛酚溶液。
