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食品和饲料中α-生育酚及α-生育酚醋酸酯
维生素和其它营养物
- α-生育酚或总的还原物的比色法
- 选择匹配的比色管装入60ml石油醚(a)(2)-无水乙醇(3+2)整个比色过程中保持恒定的弱光条件。
1 校正曲线
准确将含5μg纯α-生育酚4ml石油醚(a)(2)-无水乙醇(3+2)，置于25ml小玻瓶中。准确加入1.0ml红菲绕啉溶液，旋摇。准确滴加0.5ml FeCl3溶液并旋摇。在加完最后一滴FeCl3溶液后的正15s时，准确加入0.5ml H3PO4溶液，并旋摇，3min后显色，形成的颜色稳定90min。$$将溶液转移至匹配的比色管中，在分光光度计上于534nm处，以同样的方法制备的不加α-生育酚的试剂空白对照测定A值。$$用5－50μgα-生育酚重复步骤5次。以A对α-生育酚μg/6ml在线性坐标纸上作图。通过原点及6个点作出最合适的平滑曲线。每天检查校正曲线。当用新的试剂溶液时需绘制新的曲线。
2 比色测定
准确将含5μg纯α-生育酚4ml石油醚(a)(2)-无水乙醇(3+2)，置于25ml小玻瓶中。准确加入1.0ml红菲绕啉溶液，旋摇。准确滴加0.5ml FeCl3溶液并旋摇。在加完最后一滴FeCl3溶液后的正15s时，准确加入0.5ml H3PO4溶液，并旋摇，3min后显色，形成的颜色稳定90min。$$将溶液转移至匹配的比色管中，在分光光度计上于534nm处，以同样的方法制备的不加α-生育酚的试剂空白对照测定A值。$$用5－50μgα-生育酚重复步骤5次。以A对α-生育酚μg/6ml在线性坐标纸上作图。通过原点及6个点作出最合适的平滑曲线。每天检查校正曲线。当用新的试剂溶液时需绘制新的曲线。
