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食物中的脂肪
维生素和其它营养物
- 氯仿-甲醇提取法
- 〔本法适用于复合食物和那些不规定脂肪或类脂物分析方法的食物。本法测定的是类脂物而不是脂肪〔甘油三酸酯及其他乙醚可溶物〕〕。
A 仪器及试剂
A.a 混合装置
半微量、不锈钢捣碎用的混合组件捣碎机。
A.b 酶溶液
1%澄解酶40，000的0.5M醋酸钠溶液，在1L容量瓶中将10g澄解酶40，000悬浮于200ml 0.5M醋酸钠溶液中，用0.5M醋酸钠溶液稀释定容并充分混匀。〔4℃下贮存，至少可稳定7天〕。
B 测定
准确称取约5g完全剁碎的样品〔如脂肪含量>10%取3g)至50ml消化管中，加入足量酶溶液使总H2O量〔酶溶液加样品中原有水分〕为32ml，缓缓摇动至样品与酶溶液完全混匀。将管子置于45－50℃水浴中1h。充分混匀，并用80.0ml MeOH与40.0ml CHCl3将消化液定量转移至混合器。$$盖好盖子，高速下捣碎2min，打开盖，加入40.0ml CHCl3，再盖上，混合30s，打开盖，加入40ml H2O，盖上盖子再混合30s。$$转移提取液至250ml聚丙烯离心瓶中在约3000r/min离心10min〔转子直径为11.5in时〕，以澄清下部CHCl3层，吸取20.0mlCH3Cl3提取液至已称重的100ml烧杯中〔当心不要将水层取出〕在通风橱内于蒸汽浴上蒸干。将脂肪残渣于101℃烘箱中干燥至恒重〔约30min〕，干燥器中冷却至恒重〔约30min〕，并称重，计算%脂肪＝(g残渣/g样品×4×100)。$$〔注：CHCl3-MeOH-H2O的比例对定量提取脂肪是关键，这可能需要测定样品中的水份，以便使初始提取步骤中H2O的含量〔指酶溶液〕最为适宜。也可用于指导预测脂肪含量，以便分析时选取适当的样品〕。
